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濟南免疫親和柱的原理和使用注意事項

更新時間：2020-06-27點擊次數(shù)：1412
 　　濟南免疫親和柱是利用免疫親和層析原理即利用生物大分子具有對某一類生物大分子特異識別和可逆結(jié)合的特性而制成，用以分析檢測抗體或抗原的親和層析柱。
 
　　原理：
　　測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)，抗體連接在柱體內(nèi)，樣品經(jīng)過提取、稀釋后，緩慢的通過己烯雌酚三合一免疫親和柱，在免疫親和柱內(nèi)抗體與樣本中的雌酚類結(jié)合，之后洗滌免疫親和柱去除沒有被結(jié)合的雜質(zhì)。然后用洗脫液洗脫雌酚類，洗脫產(chǎn)物用合適的分析儀器進行檢測。
 
　　濟南免疫親和柱使用注意事項：
　　1、上柱的樣品溶液應(yīng)該保持酸堿中性、無懸浮物、甲醇濃度不宜過高；
 
　　2、若樣品為復(fù)雜樣品，例如高蛋白、高油脂、酸性樣品，可以將提取液分兩次提取樣品，可以提高提取效果；
 
　　3、樣品過柱及甲醇洗脫速度要慢且均勻，約每秒1-2滴；
 
　　4、抗原抗體發(fā)生反應(yīng)的較佳溫度是在25℃左右，實驗需要的環(huán)境溫度較好是室溫24℃-28℃，太高或太低的溫度都會對親和柱的回收率有一定的影響。在使用前需要恢復(fù)至室溫再進行實驗；
 
　　5、不要在無水狀態(tài)下，瓊脂容易干燥萎縮，影響親和柱的質(zhì)量；
 
　　6、親和柱儲存條件為4℃-8℃。切記0℃以下的低溫，因為緩沖液凍結(jié)，會嚴(yán)重影響親和柱內(nèi)的物理結(jié)構(gòu)，對親和柱的質(zhì)量影響很大；
 
　　7、洗脫一般選擇試劑甲醇，為增強洗脫效果可加大甲醇體積；
 
　　8、樣液免疫親和柱凈化后，洗脫液過0.45um或更小孔徑濾膜效果更好。